ゲノ研

前回 の続きです。 1st PCRでは目的の遺伝子を2つのフラグメントに分けて5サイクルだけの増幅を行い、増えてきたPCR産物を電気泳動で分離して精製しました。続いて1st PCR産物をつなぐための反応を行います。この方法には2通りあります。 まずは簡単なほうから...

 遺伝子の機能を解析するために特定の塩基を変更したり取り除いたりしてアミノ酸置換やフレームシフトを誘導してその影響を調べたいことがあります。 あるいは対象とする遺伝子とGFPの遺伝子をつなげて融合タンパクを作って細胞内局在を見たいといったこともよくあります。 ...

こんにちは。みなさんはblunt-end cloningどうしてます？ Proof-reading (校正) 活性のあるポリメラーゼを使ったPCR産物はTaqポリメラーゼと違って末端にA突出がなく平滑末端になっています。そのためベクターとのライゲーションはTAクロー...

混ざったね・・・。 水でも増えてくるというみなさま。あらためてこんにちは。前回の投稿（ →リンク ）のつづきです。 前回はリアルタイムPCRで水しか入れていないネガコンが増えてきてしまうという内容でした。これを書いている僕も水で増やしちゃったほうです。どうや...

グレイト！！   皆さんこんにちは。 僕が学生のときになぜか時々混入してくるプラスミドがありました。 実験で使っているプラスミドにインサートを組み込んだ後、大腸菌に形質転換して、青/白セレクションで白コロニーをとってくる。そしてそれを液体培地で増やして、プラス...

おはようございます。 先日１１月１５日と１６日にゲノム研究分野において実技トレーニングコース『リアルタイム定量PCR実践講座』を開催しました。 ２日間にわたる長めのコースでしたが当日は多数の方にご参加いただきました。ありがとうございました。 本実技トレーニングコースで...

先日、ゲノム研究分野主催のバイオトレンドセミナー 「いまさら聞けないPCRの基礎と応用」を開催しました。 ６８人のかたに参加いただきました。多数の申し込みをいただいたので場所を共通教育棟１階 1A教室に変更しての開催になりました。参加された皆様、どうもありがとうござい...